8. 向吸附柱cp4 中加入500μl去蛋白液pd，12000rpm（~13400g）離心l min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱cp4 放入收集管中。
9. 向吸附柱cp4 中加入600μl漂洗液pw（請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm（~13400g）離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱cp4 放入收集管中。注意：
加入漂洗液pw後，如果室溫靜置2-5 min，有助於更好地去除雜質。
10. 向吸附柱cp4 中加入600μl漂洗液pw , 12000rpm（13400g）離心l min，倒掉收集管中的廢液。
11. 將吸附柱cp4 重新放**集管中置於12000rpm（~13400g ）離心2 min，目的是將吸附柱中殘餘的漂洗液去除。
注意：漂洗液中乙醇的殘留會影響後續的酶反應（酶切、pcr 等）實驗。為確保下游實驗不受殘留乙醇的影響，建議將吸附柱cp4 開蓋，置於室溫放置數min，以徹底晾乾吸附材料中殘餘的漂洗液。
12. 將吸附柱自科置於乙個乾淨的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加100-300μl洗脫緩衝液tb ，室溫放置2 min，12000rpm（~13400g ）離心l min將質粒溶液收集到離心管中。
注意：為了增加質粒的**效率，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中．重複步驟12 。洗脫液的ph 值對於洗脫效率有很大影響。
若用水做洗脫液，應保證其ph 值在7.0-8.5 範圍內（可以用naoh 將水的ph 值調到此範圍）, ph 值低於7.
0 會降低洗脫效率。洗脫緩衝液體積不應少於100μl，體積過小影響**效率。且dna產物應儲存在-20 ℃ ，以防dna 降解。
質粒dna 濃度及純度檢測:
得到的質粒dna 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。電泳可能為單一條帶，也可能為2到3條dna 條帶，這主要與提取物培養時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。 od260值為 l 相當於大約 50μg/ml 雙鏈 dna 。
od260 / 0d28 。比值應為 1.7 -1.
9 ，如果洗脫時不使用洗脫緩衝液，而使用去離子水，比值會偏低，但並不表示純度低，因為 ph 值和離子存在會影響光吸收值。