1 目的
確保度他雄胺含量檢測方法準確可靠。
2 範圍
度他雄胺成品含量檢測方法方法學的驗證。
3 驗證小組成員及職責
4 驗證依據
ich q2 qc-smp014
5 驗證內容
5.1 驗證可接受標準
5.2.1 色譜條件
儀器：高效液相色譜儀
色譜柱：zorbax sb-cn，4.6×250mm，5μm
流動相：正己烷：異丙醇=95：5
柱流速：1.5ml/min檢測波長：240nm
進樣量：20μl柱溫：40℃
5.2.2 實驗用溶劑及供試品
5.2.3 溶液的配製
5.2.3.1 流動相的配製
正己烷：異丙醇=95：5
5.2.3.2 供試品溶液的配製
供試品溶液的配製：取供試品約25mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加5ml異丙醇超聲使溶解，再加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得。（平行配製兩份）
對照溶液配製：取對照品約25mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加5ml異丙醇超聲使溶解使溶解，再加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得。（平行配製兩份）
5.2.4 測定方法
測定法：分別精密量取對照品溶液和供試品溶液20μl，注入高效液相色譜儀，理論塔板數按度他雄胺峰計算應不低於3000，按外標法以峰面積計算供試品中度他雄胺的含量。
含量計算公式：
式中： as——供試品溶液中主峰峰響應值；
cs——供試品質量，mg；
ar——對照品溶液中主峰峰響應值；
cr——對照品質量，mg；
w——供試品的水分+殘留溶劑，％；
ps——對照品的含量，％。
驗證過程不考慮水分和殘留溶劑。
結果判斷：若含量（按無水物）在98.0%～102.0%之間，則判為符合規定。
5.3 專屬性
成品含量檢測方法驗證和有關物質檢測方法驗證色譜系統相同，專屬性見度他雄胺有關物質檢測驗證。
5.4 系統適應性
5.4.1 目的
確認用該儀器系統執行含量測試方法的驗證是否符合要求。
5.4.2 操作步驟
精密稱取度他雄胺對照品約25mg，置50ml量瓶中，加5ml異丙醇超聲使溶解，再加正己烷稀釋至刻度，搖勻，平行配製兩份分別為對照品r1溶液和對照品r2溶液。取對照品r1溶液連續進樣6次，記錄色譜圖，計算主峰面積的rsd%，及主峰理論塔板數；取對照品r2溶液連續進樣2次，記錄色譜圖，與對照品r1溶液計算**率。
5.4.3 測試結果
表1 系統適應性測試資料
5.4.4 結論
5.5 線性（50%～150%）
5.5.1 目的
確定在驗證範圍內，供試品濃度與峰面積之間的線性關係。
5.5.2 操作步驟
5.5.2.
1 精密稱取本品對照品 250mg，置50ml量瓶中，加異丙醇超聲使溶解並稀釋至刻度，搖勻。精密量取該溶液各2.5ml、3.
75ml、5.0ml、6.25ml、7.
5ml分別置50ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，依次製成線性溶液（相對標準濃度50%、75%、100%、125%、150%）。分別取上述溶液各20μl進樣，每份溶液平行測定2次，記錄色譜圖，計算每個濃度點的峰面積平均值。以樣品濃度對相應平均峰面積做線性回歸，計算回歸方程及相應的線性回歸係數。
回歸方程：y=kx+b。
5.5.3 測試結果
表2 鹽酸厄洛替尼線性測試資料
5.5.4 結論
5.6 重複性
5.6.1 目的
確定對於相同供試品多次稱樣測定結果的重現程度。
5.6.2 操作步驟
對照品溶液a：精密稱取本品對照品約25mg置50ml量瓶中，加稀釋劑溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。
對照品溶液b：精密稱取本品對照品約25mg置50ml量瓶中，加稀釋劑溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。
80%樣品溶液配製：取本品約20mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加5ml異丙醇超聲使溶解，再加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得（平行配製3份）。
100%樣品溶液配製：取本品約25mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加5ml異丙醇超聲使溶解，再加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得（平行配製3份）。
120%樣品溶液配製：取本品約30mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加5ml異丙醇超聲使溶解，再加正己烷稀釋至刻度，搖勻，即得（平行配製3份）。
取對照品溶液a、對照品溶液b及各樣品溶液進樣，記錄色譜圖，計算含量及rsd。
5.6.3測試結果
表3 重複性測試資料
5.6.4 結論
5.7 中間精密度
5.7.1 目的
為考察隨機變動因素對精密度的影響。
5.7.2 操作步驟
不同時間不同檢驗人員分別按照標準稱量的80%、100%和120%配製供試品測試溶液及100%對照溶液（2份）。每個濃度的供試品溶液各配製3份，計算每份供試品溶液中含量值及rsd%。
5.7.3 測試結果
表4 中間精密度測試資料
表5 兩人資料彙總
5.7.4 結論
5.8 方法準確度
5.8.1 目的
5.8.2 操作步驟
對照溶液：配製100%對照溶液2份，進樣。
加標前樣品溶液的配製：精密稱取度他雄胺樣品25mg，置50ml量瓶中，加5ml異丙醇超聲使溶解，再加正己烷稀釋至刻度，搖勻；再取此溶液2.0ml，置20ml量瓶中，平行移取10份。
加標溶液的配製：精密稱定度他雄胺對照品250mg，置50ml量瓶中，加異丙醇超聲使溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。
供試液的配製：分別移取加標溶液1.6ml、2.0ml、2.4ml各3份加入加標前樣品溶液中，用稀釋劑稀釋至刻度，另外剩餘乙份直接用稀釋劑稀釋至刻度。
測定方法：將上述對照品溶液和供試液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算樣品的加標**率，
實際檢出量=
5.8.3 測試結果
表6 方法準確度測定結果
5.8.4 結論
5.9 溶液穩定性
5.9.1 目的
確認溶液的穩定性情況。
5.9.2 操作步驟
取本品約25mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加5ml異丙醇超聲使溶解，再加正己烷稀釋至刻度，搖勻。分別在不同時間點進樣20l，記錄色譜圖。
5.9.3 測試結果
表7 溶液穩定性測試資料
5.9.4 結論
5.10 偏差討論
驗證小組成員應對驗證出現的偏差進行偏差討論：
參與討論者： 討論日期：
5.11 綜合分析評價與結論
驗證小組成員對檢測過程及記錄進行綜合分析後作出評價與結論：
結論人： 結論日期：
6 最終批准
6.1 負責人審閱上述所有測試及分析評價，最後批准。
6.2 檢驗方法經驗證合格後才能用於實際檢測。
7 再驗證
當分析儀器、色譜柱型號和品牌、工藝等發生變更時應進行再驗證。