北京雷根生物技術****
簡介:甲苯胺藍(t oluidine blue o)是一種常用的人工合成染料, 屬於醌亞胺染料類, 這類染料主要含有胺基和醌型苯環兩個發色團,從而成色原顯色。甲苯胺藍中的陽離子有染色作用, 組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色。
甲苯胺藍還含有兩個助色團,能促使染料產生電離成鹽類, 幫助發色團對組織產生染色力, 使切片上的組織細胞著色,可染細胞核使之呈藍色。
組成:操作步驟(僅供參考):
甲苯胺藍水溶液(1%)一般用於特殊用途,如果用於染色,可參考如下步驟:
(一)肥大細胞染色
1、脫蠟至蒸餾水。
2、根據切片厚度和組織的不同,浸染於甲苯胺藍染色液。
3、蒸餾水或去離子水輕輕沖洗。
4、(可選)0.5%冰乙酸分化,直到細胞核和顆粒清晰可見。
5、快速95%和無水乙醇脫水。
6、 二甲苯透明,封固。
染色結果:肥大細胞呈紫紅色;背景呈淡藍色。
(二)軟骨染色
1、 石蠟切片入二甲苯2次。
2、 系列乙醇各1min 。
3、 自來水洗2min 。
4、 入toluidine blue o stain 浸染。
5、 自來水洗2min ,濾紙吸乾水分。
6、 丙酮分化至軟骨細胞呈紫藍色清楚可見。
7、 逐級乙醇脫水。
8、 二甲苯透明,中性樹膠封固。
染色結果:軟骨、成骨細胞呈紫紅色;背景呈淡藍色編號名稱 da0052 storage 甲苯胺藍水溶液(1%) 100ml rt 避光使用說明書 1份
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(三)細胞塗片染色
1、用20%的乙醇溶液稀釋甲苯胺藍染色液, 一般要求稀釋到0.1%即可。
2、細胞塗片後,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在紙巾上。
3、滴加稀釋後的甲苯胺藍染色液進行滴染,加蓋玻片讓染料滲透到細胞中。
4、後將玻片豎起,稍加壓力,使多餘染料被紙巾吸去。
5、無需乾燥,直接鏡檢。
染色結果:細胞核、淋巴細胞呈深藍色;核仁呈紫紅色;紅細胞呈橘紅;細胞質、單核細胞呈淡藍色。
(四)原位雜交染色
1、用蒸餾水或去離子水稀釋到相應的濃度,憑經驗一般稀釋比例大於1:100。
2、玻片在稀釋好的染色液中短暫浸泡。
3、在蒸餾水或去離子水浸泡數次。
4、按需求進行壓片固定。
注意事項:
1、針對於胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色,浸染於甲苯胺藍染色液的時間應
相應延長。
2、為了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。