牛血清蛋白標準曲線

2023-02-08 01:03:06 字數 3593 閱讀 4615

牛血清蛋白表酚法定製牛血清蛋白及測定人體血清蛋白加樣操作表***樣1樣2試管編號200ug/ml牛血清蛋白標準液(ml)0.000.300.

400.500.600.

700.800.90 1.

001.00 1mol/1000ml人血清蛋白(ml)ph7.4磷酸緩衝液(ml)1.

000.700.600.

500.400.300.

200.100.000.

00 folin酚甲(ml)以上各管均加入1.00ml,振盪均勻後,反應15min folin酚乙(ml)以上各管均加入4.00ml,振盪均勻後,55℃水浴反應25mina650nm實測od值0.

0000.2380.3020.

3650.4210.4850.

5210.5730.4730.

378 表酚法定製牛血清蛋白標準曲線,微機資料處理表0123456試管編號標準牛血清蛋白呈色濃度(ug/ml)0.(r)710.0013.

3316.6720.0023.

3326.6730.000.

0000.2380.3020.

3650.4210.4850.

5210.5730.0330.

2220.2840.3470.

4100.4730.5360.

5990.018870.03298y=0.

01887x+0.032980.9934 (11黑龍江省雞西市礦業集團總醫院,黑龍江雞西158100;21黑龍江省林業總醫院,黑龍江150040)〔文章編號〕1002-2376(2004)02-0017-02〔中圖分類號〕th773〔文獻標識碼〕b〔摘要〕目的:

利用controlplasma建立一種簡便、易於臨床實驗室開展的半定量纖維蛋白原(fib)檢測方法,並對其初步評價。

方法:用亞硫酸鈉手工法檢測不同濃度fibreferenceplasma血漿的fib含量,用其為參比血漿,用半自動血凝儀測其pt凝固時間及吸光度,建立pt凝固時間(s)參比血漿濃度(%)的曲線1,及fib含量(g/l)與吸光度(e)的標準曲線2。

利用標準曲線測定待檢血漿fib的含量(g/l)。

結果:血漿fib含量與pt(s)及吸光度(e)有很好的相關性(r=01992)。

單種試劑本法測定controlplasma血漿fib值,重複性良好(cv  本方法測定結果與手工法測定結果有很好的相關性(r=01981)。

結論:本方法能檢測患者血漿的fib值,用半自動血凝儀檢測pt時,簡便,易行,重複性較好。

對溶栓患者有很好的監測效果。

〔關鍵詞〕凝血酶原時間;凝固法;纖維蛋白原;標準曲線;吸光度半自動血凝儀可同時對5個引數進行測定,利用凝固法+fib測定,制定標準曲線進行半定量檢測fib,簡便,易行,建立一種直接檢測fib含量的方法。

1材料與方法111儀器和試劑11111儀器thromboscreen400cb半自動血凝儀(美國)721比色儀37℃水浴箱。

11112試劑兔腦凝血活酶thromboplastin-dsp/n535301fibreferenceplasmahuman560502。

儀器定標血漿standardhumanplasma(美國),dadebehring公司,orkl25。

質控血漿leve1ⅰ,levelⅱ(美國)dadebehring公司。

112研究物件及標本處理11211研究物件隨機抽取50例正常健康體檢人,其中男32例,女18例,平均32歲(21~43)。

11212臨床標本處理順利抽取靜脈血118ml血,注入012ml枸櫞酸鈉(0138%)的塑料試管,混勻,1000轉離心5min,分離血漿,pt檢測2h完成。

113方法。

11311fib檢測方法手工法測不同濃度controlplasma血漿,方法按說明進行。

11312fib直接檢測方法:用半自動血凝儀對不同收稿日期:2003-08-08濃度的controlplasma血漿測定pt凝固時間及吸光度,重複三次,取均值,建立不同濃度及其pt凝固時間,吸光度,fib含量的曲線。

待檢血漿fib含量測定:按儀器說明書測定待檢血漿的pt時間及吸光度,利用曲線直接得到fib含量。

2結果fib參比血漿fib值的效正及fib標準曲線的製備。

-ds試劑測定fib參比血漿的fib值與pt凝固時間及吸光度製備的標準曲線見圖1、2。

211方法學簡單評價21111線性分析,從標準曲線上看到,fib值在110~415範圍內,與其測定pt時的吸光度有很好的線性關係。

21112同一試劑重複性測定,按上述fib直接測定法,用thromboplastin-ds凝血酶將fib參比血漿重複測定10次,計算cv值,五瓶參比血漿(fib)測定結果為:2103,1185,1193,1195。

可見手工法與直接法測定較接近。

17醫療裝備2004第2期西門子somatomdrh球管老化引起的故障檢修宋新江(浙江省湖州市第一人民醫院ct室,浙江湖州313000)故障現象:掃瞄**鍵按下後不出射線,出現的故障**為cn0060:no『geok』indataacq1window。

分析檢查:該ct機的高壓發生器為micromatic(簡稱mmct)是西門子ct機使用比較普遍的高頻高壓發生器,generatorok訊號即(geok)是在ro2tationon(**o)、filamenton(hu)訊號到達後,計算機(cpu)送出的乙個**訊號,**時觀察『**o』、『hu』黃色指示燈亮了一下就滅了說明這兩個訊號是有的,因為沒有檢測到『geok』訊號,逆變器不工作而沒有產生射線。

用pt510測試儀分別做60hz旋轉陽極、燈絲增溫、調整變壓器等測試,發現球管燈絲增溫沒有通過(heatingnotok),在tso檢測程式裡做generator(gen)測試脈衝**都是正常的,但做空氣校正(cal)或裝上病人模式(mod)做掃瞄就會出現cn0060故障,這樣可以確定高壓控制部分應該沒問題,所以重點收稿日期:2003-08-10分析檢查燈絲增溫電路,考慮該球管使用時間較長,燈絲可能老化,故適當提高燈絲電壓,把燈絲供電變壓器(t501)的初級電壓跳線由50v檔改為70v檔,測量實際電壓由45v公升到60v,測試則發現heatingok,但不能**,這樣可以斷定燈絲確有老化,70v檔電壓可能太高超出其範圍,所以想辦法在50v檔電壓的基礎上稍微提高一點電壓,但t501上只有50v、70v、80v檔可調,通過分析原理圖發現,整個高壓櫃輸入電源可以跳線決定輸入電壓的多少,測量本機輸入電壓為402v交流,而原來裝機時選擇跳線在420v,把跳線改到400v檔,測量燈絲初級變壓器電壓為46v,比改動前稍微增大,原來為45v,但還是不能正常**,再把其跳到380v檔,燈絲電壓初級為4619v,這時可以**,而且掃瞄都正常,影象質量也可以。

維修小結:這個故障比較特殊,原來以為是球管壞了,準備更換,經過仔細測試分析,確定是球管燈絲老化,但可以使用,所以在更換大的或貴的部件時應謹慎。

212臨床標本檢測,用thromboplastin-ds凝血活酶試劑直接測定法,手工法測定患者fib,結果顯示兩方法之間有很好的相關性(r=0199)。

將本方法與手工法結果進行t檢驗,表明本方法檢測的fib值接近手工檢測值,t為01583,p為01023,無圖1明顯差異。

3討論本文建立的fib測定法只須用標定了fib值的凍乾參比血漿建立fib對pt(s)及吸光度的標準曲線,因而容易在臨床實驗室開展,實驗結果顯示該方法測定的fib值接近測定血漿的真值,簡便,易行。

但該方法由於採用的是凝固法,因此溶血及黃疸的標本不易用本法測定。

影響吸光度的測定,由於本法是在單一實驗室完成,本方法臨床實用性尚須多家實驗室共同研究論證。

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